




免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。·它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。
免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。
样品要求
免疫组化染色/免疫荧光染色送样要求:
1.包埋:石蜡包埋、OTC包埋。
(1)标本要求:已固定在4%多聚甲醛中的动物组织,或已固定在FAA中的植物组织。
(2)送样要求:
a.动物组织:处死动物后立即取材,生理盐水冲洗表面,4%的多聚甲醛固定,一般组织固定48h左右进行包埋最好,大小不超过1cm*1cm*0.5cm,装组织的管子一定要比组织大,固定液是样品体积的5倍以上,以保证充分固定,封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。
注:常温或少量冰袋运输。
2.切片:石蜡切片、冰冻切片。
(1)标本要求:已包埋的动物。
(2)送样要求:
a.石蜡包埋的组织:冰袋运输。
b.OTC包埋的组织:干冰运输。
3.染色:
a.石蜡切片:脱蜡至水、抗原修复、血清封闭、一抗孵育、二抗孵育、染核、脱水、透明、封片。
b.冰冻切片:清洗去除OTC、血清封闭、一抗孵育、二抗孵育、染核、脱水、透明、封片。
(1)标本要求:切片。
(2)送样要求:
a.石蜡切片:石蜡切片码齐装在塑料切片盒中,冰袋运输。
b.冰冻切片:冰冻切片码齐装在塑料切片盒中,干冰运输。
4.拍照:普通荧光拍照、荧光数字扫描、激光共聚焦(免疫荧光可拍摄)
(1)标本要求:已染色的切片,
(2)送样要求:已染色的切片,常温或少量冰袋运输。

免疫组化
免疫荧光

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什么是免疫细胞化学法ICC?什么是免疫荧光法IF?
我们先明确几个概念。“Immuno”是指基于抗体的染色。“Cyto”一般是指细胞,免疫细胞化学在完整细胞的样本上进行。免疫荧光则是通过荧光标签使目的标志物可视化,但荧光标记可用于免疫细胞化学法(细胞)或免疫组织化学法(组织)。
从概念的范围来看,免疫荧光的覆盖范围更大,包括免疫组织化学和免疫细胞化学。换句话说,免疫组织化学法和免疫细胞化学法是免疫荧光法的一种。
免疫荧光法是一种用于确定蛋白在自然组织切片中的表达及其表达位置的分析方法。免疫荧光法可用于培养细胞系、组织切片或单个细胞。免疫细胞化学法用于完整的细胞样本。免疫荧光法可用于分析细胞或组织中蛋白质、聚糖以及生物和非生物小分子的分布。

