
微生物多样性分析

16s rDNA测序,18s rDNA测序,ITS测序,微生物群落分析,等

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微生物多样性测序(又称扩增子测序),是指利用二代/三代测序平台,对16S rDNA/18S rDNA/ITS/功能基因等特定区段的 PCR 产物进行高通量测序,突破传统方法不可培养微生物的缺点,获得土壤、水体等环境,以及人体、动物等样本中的微生物群落结构、进化关系以及微生物与宿主的相关性等信息。与传统方法相比,无需纯培养,大大减少了研究的费用、周期并提升了物种丰富度。
样品要求
污泥、土壤采样后置于无菌离心管内,短期可置于-20度,长期置于-80度保存,低温寄送,样品量>3g
动物粪便及肠道内容物,由于动物体内多种酶类可能会发生生物降解,取样器材尽量灭菌,用无菌离心管装样后寄送,长期保存于-80,干冰寄送,样品量不足时可以多次取样收集,样品量根据具体动物类型决定
水体样品可选用0.22 μm或者0.45 μm的滤膜过滤后寄送滤膜,一般一次送1-2张/样


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微生物多样性是否能鉴定到菌株的种或者属?测全长和扩增子有什么区别?
一般做二代测序(即扩增子测序)可以鉴定到属,三代一般是测菌的全长,信息量更多一些,有一些种属可以精确到种的信息,但是个别亲缘关系很近的,不一定能鉴别开。
真菌、细菌、古菌全长引物包含区段引物序列(V3V4,IT1区等),全长可以更准确的物种分类,更多的物种鉴定,能精确定位到“种”水平。
全长测序使用三代测序平台。基于PacBio 测序平台测序,相比较二代测序只选择 1-2 个高变区进行测序,三代可以获得全长的序列,更多变异区信息可以提高物种鉴定的分辨率,还可以提高对于群落组成的鉴定的精度,更加真实的还原样本中微生物群落结构。

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赵工 15757137609
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