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激光共聚焦显微镜(生物)
仪器型号:
leica stellaris5,Zeiss LSM 880,Leica-SP8 SR,LEICA TCS SP8,等
预约次数:
1507次
服务周期:
8个工作日
项目介绍

激光共聚焦扫描显微成像(Laser Scanning Confocal Microscopy),是以激光作为光源,逐点激发样品内荧光,采用精密针孔滤波技术,有效抑制了非聚焦平面的杂散光,具有层析成像能力和很高的成像信噪比,从而获得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,已经成为分子细胞生物学、遗传学、形态学、医学、药理学等领域强有力的研究工具。

仪器功能应用:

• 细胞形态观察,细胞或组织内部微细结构的荧光图象的采集;

• 细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量;

• 活细胞动态观察。

 

样品要求

一、菌液/污泥/污水类样品

  1. 样品量

5000 rpm离心10 min,可得到绿豆大小沉淀,参考图(1.5 mL离心管)大小的菌体沉淀。

  1. 寄送要求

(1)若为细菌类需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。

(2)若为蛋白/多糖类染色,一般加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,样品不和冰袋接触。

(3)若为污泥类样品可以进行冰切或者刀切,冰切收费50/样。

二、生物膜样品

  1. 样品量

金属/瓷砖/岩石等块体类建议长宽高尺寸不超过1 cm,薄膜类直径尺寸不超过2 cm;且均要求样品表面平整,需要标出拍摄面。

  1. 寄送要求

(1)一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触;

(2)若在爬片上培养生物膜,可将爬片粘于培养皿底部,充满培养基,封口膜密封完全,再4度保存。

三、植物类

  1. 说明:

(1)植物类样品可进行简单冰切及刀切,软化等特殊类请走病理组织切片测试项目;

(2)一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触;

(3)平台做过的植物类样品淀粉、胡萝卜,土豆、叶片、根、茎,拟南芥等。

四、需要与细胞共培养的样品

(一)块体类—薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等

  1. 送样量

(1)与细胞的作用方式为直接接触的话,至少1个/种细胞/时间点;

(2)样本处理方式为浸提的话,可参考国标ISO 10993-12 2007中的浸提方式浸提,根据浸提方式按量和检测时间点提供;

  1. 制样要求

若是需要把细胞接种到材料上的话,金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形/方形,建议制备直径为10-15 mm圆形。布料、纸片类样本可代为裁剪,默认制备直径为15 mm。

(二)液体类

 送样量:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的 3-5倍的量 寄送。

  1. 若采用稀释后样本测试,则须告知稀释倍数及工作液浓度;
  2. 若溶剂为有机溶剂(如DMSO,醇类,酚类等),最高工作液浓度中,溶剂的占比低于0.5%。

(三)粉末类

送样量:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;

  1. 若为可溶性粉末:注明溶剂的种类(如无水乙醇,异丙醇,DMSO,培养基,PBS或者生盐水等),当样品对溶剂有特殊需求时,请在送样时附加所需溶剂;
  2. 若为不可溶粉末:注明样本性质,灭菌方式,及分散为均匀悬浮液所需必要步骤。

(五)无需染色直接拍摄类样品

  1. 细胞类样品直接拍摄,需要封片后常温避光邮寄。
  2. 固体类直接拍摄样品建议长宽不超过20mm,厚度不超过10mm,重量不超过10g,一定标出测试面。
  3. 微米材料直接拍摄类建议进行云视频沟通,且微粒尺寸不低于5微米。

其他说明:

  1. 激发和发射波长说明:需要提供清楚激发/发射波长,拍摄类型2D/3D,拍摄倍数等要求;
  2. 染料说明:需要您标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长);

 

 

结果展示

小鼠脑神经干细胞切片共聚焦成像

Hela细胞F-Actin染色共聚焦成像

常见问题
  • 激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别?

    激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。

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