




荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性研究的工具之一。
样品要求:
1、菌液/污泥/污水类样品
① 样品量:5000 rpm离心10 min,可得到绿豆大小沉淀
②细菌类需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触。
③蛋白/多糖类染色,一般加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,样品不和冰袋接触。
④污泥类样品可以进行冰切或者刀切,冰切收费50/样。
2、生物膜样品
①样品量:金属/瓷砖/岩石等块体类建议长宽高尺寸不超过1 cm,薄膜类直径尺寸不超过2 cm;且均要求样品表面平整,需要标出拍摄面。
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触
③若在爬片上培养生物膜,可将爬片粘于培养皿底部,充满培养基,封口膜密封完全,再4度保存。
3、植物类
①植物类样品可进行简单冰切及刀切,软化等特殊类请走病理组织切片测试项目
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,样品不和冰袋接触
③做过的植物类样品淀粉、胡萝卜,土豆、叶片、根、茎,拟南芥等。
4、需要与细胞共培养的样品:
①块体类—薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等
送样量:
(1)与细胞的作用方式为直接接触的话,至少1个/种细胞/时间点;
(2)样本处理方式为浸提的话,可参考国标ISO 10993-12 2007中的浸提方式浸提,根据浸提方式按量和检测时间点提供;
制样要求:若是需要把细胞接种到材料上的话,金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形/方形,建议制备直径为10-15 mm圆形。布料、纸片类样本可代为裁剪,默认制备直径为15 mm。
②液体类
送样量:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;若采用稀释后样本测试,则须告知稀释倍数及工作液浓度;若溶剂为有机溶剂(如DMSO,醇类,酚类等),最高工作液浓度中,溶剂的占比低于0.5%;。
③粉末类
送样量:根据测试时样本浓度和检测时间点而定,按照单次检测需要的3-5倍的量寄送;
(1)可溶性粉末:注明溶剂的种类(如无水乙醇,异丙醇,DMSO,培养基,PBS或者生盐水等),当样品对溶剂有特殊需求时,请在送样时附加所需溶剂;
(2)不可溶粉末:注明样本性质,灭菌方式,及分散为均匀悬浮液所需必要步骤
5、需要提供清楚激发/发射波长,拍摄倍数等要求,
6、染色剂,标明染料名称和拍摄条件(激发/发射波长,)
7、细胞类样品直接拍摄,需要封片后常温避光邮寄。
8、固体类直接拍摄样品建议长宽不超过20mm,厚度不超过10mm,重量不超过10g,一定标出测试面。


-
激光共聚焦拍照和普通荧光显微镜拍照有什么不同?
共聚焦用激光作为光源,光电倍增管做检测器,逐点扫描,对应每个像素其能量比较高;汞灯虽然总功率高,但属于场照明,对应每个像素的能量并没有激光高。激光共聚焦有针孔,可以排除焦平面上焦点以外及非焦平面杂散光的影响,因为空间分辨率提高,但因为是每个像素每个像素逐点扫描,采集较慢,一张图并不是同一时间采集的,时间分辨高不高:CCD拍照取的是样本的同一时间。

