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圆二色谱
仪器型号:
JASCO-J1500,Applied Photophysics Lt, JASCO810,Jasco-815
预约次数:
1896次
服务周期:
6个工作日
项目介绍

圆二色光谱仪主要用于手性光学活性物质的研究。可用于有机立体化学研究、光学活性物质纯度测试、药物定量分析、天然有机化学、生物化学与宏观大分子、金属配合物化学、聚合物化学、蛋白质折叠研究、蛋白质热稳定性测量、能够进行手性物质的磁二色的测量,如生物大分子的光学活性来源于其特有的空间结构。如多肽和蛋白质的α螺旋,β折叠;多聚核苷酸及核酸的单股,双股,三股螺旋;以及一些糖的螺旋结构。这些特有的空间结构是它们表达生物功能的结构基础。通常由圆二色光谱的形状,谱峰位置,强度及它们随实验条件的变化来得到这些很重要的结构信息。

 

样品要求

液体类
(1)测试时需要空自溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml
(2)样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号):不同物质,最佳浓度不同,测试时不对浓度进行摸索
A:如之前测过 CD 或有相关文献,建议按对应浓度准备;
B:如没测过 CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测 CD 的话浓度偏高);

C:如以上均无,建议按0.5mg/ml 来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适
(3)DMSO和一些离子液体在低波长段会有吸收,导致CD数据不准,影响二级结构计算
固体类
(1)粉末至少30mg
(2)薄膜样本直径大于1cm
(3)块体大小1cm*1cm

结果展示

提供原始数据表格,需要了解详细的结果形式,请联系我们工作人员

不同仪器给出数据格式不同
①csv和pdf格式,csv格式文件可以用Excel打开,origin软件编辑
②jws和txt格式文件,txt格式文件可以打开导入excle,origin等软件编辑

 

常见问题
  • 蛋白溶液里含有手性物质,对圆二色谱测试有影响吗?

    圆二色谱(CD) 可以测蛋白的二级结构,但是溶液中手性物质(如透明质酸等)的含量一定要很 低,如果含量过高,手性物质也是有吸收和 CT 信号。如果想要蛋白的准确测量 值,就需要同等浓度的手性物质来作为背景扣除,手性物质浓度一般以测紫外为 准,要求紫外 190nm-260nm 信号吸收不能超过 2

  • 溶剂或空白对测试的影响有哪些?

    液体CD:每种溶剂都有截止波长(可以网上查询),测试范围的最小波长不能低于溶剂的截止波长。(例如乙醇的截止波长205nm,则测试范围最小能到205nm)。缓冲液的浓度过高(一般不高于5mM),很可能在190-200nm会有吸收,从而影响结果。
    固体CD:用于压片的溴化钾在195nm以下会有吸收,氯化钾在190nm以下会有吸收,对应的测试范围也只能到195nm或者190nm。

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