欢迎来到北京国信中业科学技术院!
咨询热线:400-883-1960|我的订单|关于我们|在线咨询
  • 注册即送

    200元首样免单券

  • 新客专享

    超大折扣

  • 邀友得返利

    10%返利

  • 注册即送
    200元首样免单券
    AI科研工具免费用 抽奖100%中好礼
  • 新客专享
    30+检测项目
    优享超低折扣6折起
  • 邀友得返利
    10%返利
    邀友测试可得最高10%返利
  • 微信登录/注册
  • 短信登录/注册
  • 密码登录
  • 获取验证码
    登录或注册即代表您同意用户协议隐私协议
  • 登录或注册即代表您同意用户协议隐私协议
蛋白质谱鉴定
仪器型号:
Triple TOF 4600 (AB SCIEX)等
预约次数:
836次
服务周期:
15个工作日
项目介绍

蛋白质质谱鉴定的基本原理是用蛋白酶将蛋白质消化成肽段混合物,经MAILDI或ESI等软电离手段将其离子化,然后通过质量分析器将具有特定质核比的肽段离子分离开来。通过实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对,进行蛋白鉴定。

蛋白质(protein)是有机大分子,是构成细胞的基本有机物和生命活动的主要承担者。蛋白质在催化生命体内各种反应进行、新陈代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着重要的作用。蛋白质的一级结构是氨基酸序列,通过鉴定氨基酸序列来匹配它的蛋白质,这是定性研究,是蛋白质组学的基础,也是蛋白质组学的重要技术之一。

质谱一般由离子源(Ion source)、质量分析器(Mass analyzer)和离子检测器(Detector)三部分组成。传统的质谱仅用于小分子挥发物质的分析,但随着新的离子化技术的出现,如基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)等,质谱技术的出现为蛋白质分析提供了一种新的途径。现在蛋白质组学基本研究手段是:以生物质谱技术为核心,对蛋白质进行大规模、高通量分离、鉴定和分析。

 

样本要求

1、SDS-PAGE gels样品
      (1)Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain样品均可,银染的样品无需脱色处理;
2、液体样品(In solution format)
      (1)样品中蛋白量>10ug,对样品的缓冲体系没有要求;
      (2)样品中蛋白量<10ug,尽量减少SDS等表面活性剂的使用,并注意降低盐浓度;
3、Co-IP样品
      (1)如果您洗脱的样品需要跑胶,请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可;
      (2)推荐使用HPH EB (0.5 M NH4OH, 0.5 mM EDTA) 缓冲体系进行蛋白洗脱;
4、样品运输
      (1)推荐将样品冻干后进行运输。
      (2)液体样品推荐干冰运输,短途运输冰袋也可以。
      (3)在样品准备过程中需佩戴手套和头套,尽量避免自身蛋白对样品的污染。

 

结果展示
常见问题
  • 未知蛋白质是质谱测序还是蛋白质测序仪测序?

    比较简单的方法是质谱,成本也不贵。  如果质谱不能确定,也可以结合N端测序。  这两个数据组合分析基本可以确定目标蛋白。

  • 凝胶可以长期保存吗,如何储存和运输?

    蛋白胶可以长期保存,不影响质谱鉴定。  一般来说,如果是一两周内,最好用保鲜膜包好,存放在4度的冰箱里。   若保存时间超过1个月,可将蛋白斑点取出,置于-20℃或-80℃冰箱中,不影响后续质谱鉴定。  运输胶点时,可以常温运输,三到五天不会有太大影响。

  • 蛋白质谱鉴定不成功一般有哪些因素?

    质谱鉴定不成功主要可以分为两类,一类是质谱效果不好,一类是没有可参考的蛋白数据库,质谱效果不好的原因又可以细分为蛋白点太淡以至于蛋白含量过低(常见银染的点)、蛋白酶解及质谱操作失误等,要避免这些因素要尽量取颜色深一些的蛋白点,并且取的蛋白点面积需要适当大一些。

中业检测
立享减免 突破低价
点击查看
技术顾问
赵工 15757137609
扫码咨询技术顾问